Le plasmide de 90 mda d'azospirillum brasilense : etude structurale et fonctionnelle
Institution:
Paris 11Disciplines:
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Abstract FR:
Azospirillum est une bacterie fixatrice d'azote qui colonise les racines des graminees sans former de structures differenciees. Elle secrete des phytohormones et est d'interet agronomique. Le mecanisme moleculaire et les genes bacteriens impliques dans l'interaction avec la plante ne sont pas connus. Les genes bacteriens impliques dans l'interaction avec la plante sont portes sur des megaplasmides chez rhizobium et agrobacterium. Azospirillum heberge des gros plasmides. Un fragment homologue aux genes de nodulation, hsn, de r. Meliloti a ete localise sur un plasmide de 90 mda de a. Brasilense sp7, appele p90. Ce fragment a ete identifie comme portant les genes nodpq. La localisation de ces genes nous a conduit a entreprendre une etude plus approfondie du p90. Le p90 a ete purifie et sa carte physique a ete etablie. Six fonctions ont ete localisees, la region homologue aux genes nodpq de r. Meliloti, les regions qui complementent les mutations dans exob et exoc de r. Meliloti, deux loci codant pour la resistance a l'ampicilline et une region necessaire au maintien du p90 comme un replicon independant. La guerison du p90 par incompatibilite avec les plasmides portant l'origine de replication du p90 a conduit a l'obtention de derives apparemment gueris du p90. Les analyses supplementaires ont revele que dans ces souches le p90 est integre dans le chromosome. Ceci suggere l'existence sur ce plasmide de fonctions bacteriennes essentielles. L'autotransfert du p90 n'a pas ete demontre mais la mobilisation du p90-tn5-mob chez a. Tumefaciens a ete obtenue a la frequence de 10##4, avec le plasmide helper pjb3ji, et le plasmide a ete retrouve sous forme d'un cointegrat. Toutes les souches d'a. Brasilense et d'a. Lipoferum contenant un plasmide de taille voisine du p90 presentent de l'homologie avec p90. Ces resultats nous ont permis de proposer l'existence d'une famille de plasmides avec des