thesis

Reparation preferentielle chez la levure saccharomyces cerevisiae : effet des lesions induites par les psoralenes plus uva, role des genes de reparation et du cycle cellulaire

Defense date:

Jan. 1, 1995

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Institution:

Paris 6

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Les mecanismes impliques dans l'heterogeneite de la reparation au niveau du genome decrits chez les cellules pro- et eucaryotes ne sont pas encore bien compris. Dans le present travail, nous avons etudie chez la levure saccharomyces cerevisiae la dependance de ce phenomene selon le type de lesions induites dans l'adn, selon la capacite des cellules a effectuer certaines etapes de la reparation ou selon les phases du cycle cellulaire. Nous avons utilise le systeme mat-alpha/hml-alpha qui permet de comparer, dans une souche haploide, deux sequences identiques qui varient dans leur activite transcriptionnelle et dans la structure de leur chromatine: mat-alpha est actif et possede une structure ouverte de la chromatine alors que hml-alpha est inactif car la structure de sa chromatine est compactee par des proteines sir. Chez un mutant sir3, le locus hml-alpha est dereprime et devient actif. En ce qui concerne la specificite de lesions, nous demontrons que les monoadditions (ma) induites par le 3-carbethoxypsoralene plus uva et les pontages interbrins (pint) induits par le 8-methoxyposralene plus uva (uniquement a forte dose) sont elimines plus rapidement dans le locus mat-alpha actif compare au locus hml-alpha inactif. Cette difference est absente dans un mutant sir3. Comme pour les dimeres de pyrimidine, le mutant rad16 est incapable d'eliminer les ma et les pint induits dans le locus hml-alpha inactif. L'incision des pint est absente chez les mutants rad1 et rad2-delta. L'incision des pint est preferentielle chez les mutants rad52 et pso2. Ceci montre que les genes rad1 et rad2 sont indispensables a la reparation des pint et que les genes rad52 et pso2 ne sont pas impliques dans l'incision preferentielle des pint. L'etude au cours du cycle cellulaire demontre que l'incision preferentielle des pint induits par le 8-mop plus uva est independante de la phase consideree