Etude de la regulation du ca#2#+ intracellulaire, de l'antiport na#+/h#+ et du symport na/k/2cl dans les acini de glande parotide du rat. Role des recepteurs beta-adrenergiques
Institution:
Paris 11Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
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Abstract FR:
Nous avons analyse dans des acini de glande parotide deux voies de transduction des signaux de type hormonal qui utilisent des recepteurs, des enzymes et des canaux ioniques: la voie ca2+/ip3 qui est couplee aux recepteurs cholinergiques de type muscarinique, -adrenergiques et des recepteurs de la substance p, et la voie ampc couplee aux recepteurs -adrenergiques. Pour realiser ce travail, nous avons isole des acini a partir de glande parotide de rat. Cet acini pour certaines experiences sont permeabilises. Nous avons aussi mis au point des techniques de fluorescence nous permettant de mesurer la concentration du calcium intracellulaire, les mouvements du calcium dans des acini permeabilises, les activites de deux systemes de transports ioniques a savoir l'antiport na+/h+ et le symport na/k/2cl par la mesure du ph intracellulaire a l'aide de sondes (fura2, fluo3, bcecf). Les resultats peuvent se resumer ainsi: dans la premiere partie de ce travail, nous avons utilise les effets de cccp un decouplant mitochondrial, de la thapsigargine un inhibiteur de la ca#2#+-atpase et de l'ip3 un second messager qui libere le ca#2#+, pour mettre en evidence differents pools endogenes de calcium dans les acini permeabilises. Les effets de deux analogues d'ip3: l'insps3 et le 6-deoxy-ip3 nous ont permis de montrer que la reaccumulation du calcium apres effet d'ip3 ne s'effectue pas uniquement dans les pools sensibles a l'ip3 et n'est pas due aussi a une eventuelle hydrolyse d'ip3. Des etudes de liaison d'ip3 sur ses recepteurs et l'action d'atp sur celle-ci ont permis d'etablir la relation possible au niveau des courbes dose-reponses entre la fixation d'ip3 et son effet liberateur de calcium. Dans la deuxieme partie nous avons montre que la stimulation des recepteurs -adrenergiques conduit a une mobilisation du calcium intracellulaire a partir d'un pool non encore identifie, provoque une activation du symport na+,k+,2cl#, independamment de l'amp cyclique intracellulaire, et induit une inhibition partielle de l'antiport na+/h+. Le lien entre |ca#+#+|i et phi est possible mais non etabli. Les resultats de ce chapitre completent ceux obtenus precedemment par d'autres auteurs et devraient permettre d'approfondir les recherches pour l'identification des pools de calcium impliques dans la stimulation des recepteurs -adrenergiques et pour etablir un lien entre phi et |ca++|i lorsque ces recepteurs sont stimules