Abstract FR:

L'embryogenese somatique est une technique particulierement interessante pour la propagation clonale d'arbres selectionnes. Cependant, elle est le plus souvent limitee a du materiel juvenile. Dans le but de mieux comprendre les mecanismes mis en jeu et d'identifier les tissus potentiellement embryogenes sur des arbres adultes, nous avons recherche des marqueurs proteiques associes a l'embryogenese somatique. Des cultures embryogenes (ce) et des cultures non-embryogenes (cne) ont ete initiees a partir de cotyledons de jeunes semis de picea abies. Les semis ont ete conserves et des plantes ont ete regenerees a partir des ce. Le modele vegetal ainsi etabli a ete exploite pour la recherche de marqueurs. Un marqueur intracellulaire non glycosyle de 35 kda, appele n35, est specifique des cne, alors qu'un marqueur extracellulaire glycosyle de 63 kda, appele e63, est specifique des ce. La specificite de ces polypeptides est independante du nombre de subcultures et des conditions d'eclairement. Elle a ete montree sur 15 genotypes. L'evolution des marqueurs au cours de l'induction et de l'expression de l'embryogenese, au cours de la regeneration de plantes somatiques, et dans les tissus de la plante mere indique que : - la presence du marqueur n35 dans les tissus est susceptible d'etre negativement correlee a leur aptitude a initier des embryons somatiques ; par ailleurs, ce marqueur pourrait etre lie a la capacite des tissus a verdir ; - le marqueur positif e63 et des glycopeptides extracellulaires de 120 kda sont synthetises pendant la phase d'expression de l'embryogenese. D'autres glycopeptides extracellulaires de 63 kda, distincts de la e63, apparaissent comme des marqueurs de l'induction ou des marqueurs precoces de l'expression de l'embryogenese. La connaissance d'une sequence partielle de la e63 permet d'envisager l'accession au gene par le criblage d'une banque d'adn complementaire avec des oligonucleotides degeneres. De plus, des anticorps polyclonaux ont ete diriges contre la n35. A l'aide de ces outils moleculaires, la pertinence des deux marqueurs pourra etre verifiee et leur presence pourra etre recherchee chez d'autres especes de coniferes.