Abstract FR:

La mutagenese insertionnelle constitue un outil de choix pour isoler des mutants et acceder aux genes responsables. Dans la premiere partie de la these nous avons mis au point un systeme d'etiquetage de genes a l'aide de l'element transposable activator (ac) du mais chez nicotiana plumbaginifolia. Prealablement, nous avons caracterise la transposition de ac chez ce nouvel hote heterologue. La mutagenese insertionnelle a permis l'isolement d'un mutant etiquete, aba2, deficient en acide abscissique (aba). L'aba joue un role-cle dans le developpement et la germination des graines, et dans la reponse aux stress de l'environnement. Le mutant aba2 est bloque dans la premiere etape de la voie de biosynthese de l'aba chez les plantes superieures, l'epoxydation de la zeaxanthine, ce qui conduit a une accumulation de cette derniere. La deficience en aba qui en resulte provoque la germination precoce des graines et le fletrissement des plantes cultivees en serre. Ce mutant est vraisemblablement l'homologue du mutant aba d'arabidopsis thaliana. L'adnc correspondant au locus aba2 a ete isole et sequence. Sous controle du promoteur 35s, il complemente la mutation aba2, retablissant le profil de carotenoides des plantes sauvages. L'adnc code pour une proteine de 72,5 kda, possede un peptide signal d'adressage chloroplastique, et presente des homologies avec plusieurs monooxygenases et oxydases d'origine bacterienne (sites de liaison a l'adp et au fad). Sur la base de la sequence proteique predite, de la localisation chloroplastique de la proteine aba2, et du phenotype du mutant, le locus aba2 coderait pour la zeaxanthine epoxydase. Aba2 est le premier gene de biosynthese de l'aba clone a nos jours. Il offre la possibilite d'etudier la regulation de la voie et sa localisation subcellulaire