thesis

Expression de marqueurs phénotypiques, albumine et acides biliaires, et des gênes recombinants, hgh, neo et ha-ras#e#j. Dans des cultures de cellules hépatiques murines

Defense date:

Jan. 1, 1993

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Institution:

Dijon

Disciplines:

Directors:

Abstract EN:

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Abstract FR:

Une lignée hépatique de fibroblastes, mf, et une épithéliale, sh, ont été co-transfectées par les plasmides pej et p17hghneo encapsules dans des liposomes et portant respectivement les gênes de l'oncogène cellulaire ha-ras#e#j, de l'hgh et neo. Grace au marqueur hgh deux lignées recombinantes clonées, les fibroblastes temf, et les épithéliales tmsh, secrétèrent d'une façon constante 1,5 g d'hgh par 10#6 cellules/24 h après induction thermique. La lignée tmsh exprimait donc les gênes recombinés, en plus de l'albumine et des acides biliaires (ab), deux phénotypes de la lignée sh. La sécrétion des ab a été comparée entre ces lignées et des hépatocytes. Les hépatocytes secrétèrent les ab primaires, l'acide chenodesoxycholique (cdc) et l'acide cholique (ch), et secondaires, l'acide bêta-muricholique (beta-mc), sous forme conjuguée alors que les lignées épithéliales ne secrètent que les ab primaires sous forme libre et conjuguée. Un milieu de culture sans sérum a permis l'étude de l'action de différents effecteurs et substrats sur ces secrétions. La déxamethasone induisit la sécrétion des ab ainsi que la transformation du cdc en beta-mc. Le cholestérol non estérifie surtout exogène apporte par l'albumine ou par les liposomes a agi de même. L'addition des ab exogènes n'a pas montre d'effet négatif sur cette sécrétion, mais agit sur l'équilibre entre la voie du ch et celle du cdc couplée au beta-mc, selon l'ab ajoute. De plus, le cdc, endogène et exogène, a été activement transforme en beta-mc par les hépatocytes surtout sous la forme tauro-conjuguée.