La nadh : ubiquinone oxydoréductase de la bactérie photosynthétique Rhodobacter capsulatus : étude et caractérisation de 5 gènes (nuo8, nuo10, nuo11, nuo12 et nuo13) homologues aux gènes mitochondriaux nd1, nd6, nd4L, nd5 et nd4
Institution:
Université Joseph Fourier (Grenoble)Disciplines:
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Recemment, deux genes (nuo8, nuo9) de la bacterie photosynthetique rhodobacter capsulatus, codant des proteines analogues aux sous-unites nd1 et tyky de la nadh:ubiquinone oxydoreductase bovine (complexe l) ont ete clones. Une mini-banque d'adn genomique de la bacterie r. Capsulatus a ete construite dans le vecteur lamdagem-11 pour explorer les regions de l'adn adjacentes aux genes nuo8 et nuo9. Le dechiffrage de la sequence d'un fragment d'adn de 4. 915 pb, localise a portee immediate du gene nuo9, a permis de mettre en evidence 4 genes (nuo10, nuo11, nuo12, nuo13) codant des proteines hydrophobes respectivement analogues aux sous-unites nd6, nd4l, nd5 et nd4 du complexe l mitochondrial. Des souches mutantes de r. Capsulatus ont ete obtenues par insertion d'une cassette de resistance a la kanamycine dans les genes nuo8 et nuo12. Ces mutations retentissent sur le developpement de la bacterie: le developpement aerobie est fortement ralenti, le developpement photoheterotrophique necessite du co#2, les bacteries ne se developpent pas en photoautotrophie. La caracterisation polarographique et biochimique des souches mutantes montre l'absence totale d'activite nadh:ubiquinone oxydoreductase. Les spectres rpe, realises sur les membranes des souches mutantes reduites par le dithionite montrent l'absence des signatures caracteristiques des centres fe-s du complexe l de la bacterie. Ces resultats demontrent que le locus nuo de r. Capsulatus, code pour la nadh:ubiquinone oxydoreductase de la bacterie. La destruction de l'un ou l'autre des genes nuo8 et nuo12 entraine l'absence d'assemblage du complexe l dans la membrane bacterienne. Le retentissement des mutations sur le developpement bacterien est attribue a des perturbations de la balance redox