thesis

Apport de la cytométrie à balayage à l'étude de la prolifération cellulaire

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Jan. 1, 1991

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Abstract FR:

Ce memoire de these traite de l'etude de divers aspects de la proliferation, de l'expression de genes ou d'anomalies genetiques par cytometrie a balayage. Une premiere partie concerne la quantification et la description de la repartition intranucleaire du marquage par l'anticorps ki-67 au cours du cycle cellulaire. Nos travaux ont permis de montrer que le marquage est nucleolaire pendant la phase g#1, puis devient nucleoplasmique au debut de la phase s. En metaphase, le marquage est peri-chromosomique. Son intensite augmente au cours du cycle pour devenir maximale en g#2-m. Dans le compartiment g#0g#1, par contre, trois evolutions differentes ont ete observees. Nous avons formule l'hypothese que les variations de la quantite et la distribution de l'antigene ki-67 pendant la phase g#1 marquent de points de regulation du cycle cellulaire, en revelant une m-cycline. Une deuxieme partie concerne la quantification du marquage par l'argent des organisateurs nucleolaires (ag-nor) au cours du cycle cellulaire. La quantite de marquage ag-nor rendrait compte du taux de synthese proteique, lui-meme facteur limitant de la croissance en taille de la cellule et de la duree du cycle cellulaire. La mesure du marquage ag-nor moyen dans les cellules en cycle d'une population cellulaire permettrait d'evaluer la duree du cycle. L'anticorps ki-67 et la mesure du marquage ag-nor sont complementaires et permettent d'evaluer respectivement le coefficient de proliferation (p) et la duree du cycle (tc). Enfin, la quantification d'hydridation in situ a ete testee pour mesurer le nombre de copies d'un gene et son expression