Abstract FR:

Avec la mise en place de l'observation à fort grossissement (x6600) et en temps réel de spermatozoïdes humains vivants et mobiles, ou high magnification Motile Sperm Organelle morphology. Examination (MSOME), des anomalies non systématiquement analysées au spermocytogramme conventionnel ont été décrites : les vacuoles spermatiques. Malgré une méconnaissance de la nature physiopathologique de ces vacuoles, elles ont rapidement été considérées comme un facteur pronostic en Assistance Médicale à la Procréation. Notre travail de thèse a consisté en une caractérisation plus précise de ces vacuoles, afin de mieux définir leur place dans la prise en charge de l'infertilité masculine. Nous avons tout d'abord cherché d'éventuelles anomalies spermatiques associées à la présence de ces vacuoles, notamment au niveau nucléaire et acrosomique. Pour cela, nous avons choisi de travailler à l'échelle cellulaire, sur des spermatozoïdes sélectionnés individuellement sous microscopie haute résolution et présentant de larges vacuoles (>13% de la surface de la tête). Une localisation nucléaire exclusive de ces larges vacuoles a été observée en microscopie électronique à transmission et en microscopie confocale. Nous avons également mis en évidence une altération de la morphologie des acrosomes, un trouble de la condensation de la chromatine spermatique, une augmentation de l'aneuploïdie spermatique, et une modification de l'architecture chromosomique en présence de larges vacuoles. Parallèlement à ces investigations à l'échelle cellulaire, nous avons cherché à apprécier le rôle des vacuoles spermatiques dans le diagnostic d'infertilité masculine. Dans cette optique, nous avons analysé les paramètres d'observation en MSOME de 440 hommes, en les confrontant aux données du spermogramme conventionnel. Au terme de notre étude, la surface vacuolaire relative est apparue comme un élément permettant de discriminer les hommes avec un spermogramme normal ou altéré, pouvant alors participer au diagnostic d'infertilité masculine. Par ailleurs, une méthodologie objective et précise, une grille de lecture ont été proposées pour l'évaluation en MSOME, ainsi qu'une indication préférentielle du recours à la microscopie à fort grossissement : la tératozoospermie. Au terme de ce travail, les vacuoles spermatiques, notamment celles dites larges, apparaissent plus clairement comme le reflet d'anomalies nucléaires du spermatozoïde ; leur présence constitue un argument diagnostique supplémentaire de l'infertilité masculine. Ces éléments justifient alors le recours à l'Intracytoplasmic Morphologically Selected Sperm Injection (IMSI) dont les indications doivent être néanmoins précisées à l'avenir.