Abstract FR:

Le transporteur adp/atp est une proteine de la membrane interne mitochondriale qui assure l'export, vers le cytoplasme, de l'atp neosynthetise dans la matrice, en echange d'adp. Ce systeme de transport peut etre inhibe de maniere tres specifique par l'atractyloside (atr) et le carboxyatractyloside (catr) d'une part, et l'acide bongkrekique (ba) d'autre part. Les travaux presentes dans ce memoire se rapportent a l'etude topographique du transporteur adp/atp de saccharomyces cerevisi. Nous avons travaille avec une souche de levure n'exprimant que l'isoforme anc2, modifiee par une extension polyhistidine en son extremite c-terminale, et appelee anc2-ht. La premiere partie de ce travail a consiste a determiner les sites de fixation de derives de substrat ou d'inhibiteur sur le transporteur adp/atp par photomarquage. Differentes sondes, photoactivables et radioactives, ont ete synthetisees. Elles ont permis d'explorer le transporteur insere dans la membrane mitochondriale. La fixation covalente d'un derive de substrat, l'an-adp (2-azido-3-o-naphtoyl 3 2padp), a ete localisee dans deux regions du transporteur, situees entre les residus s182-r190 et i310-k317. Un derive d'atr, i 1 2 5iasa (3- 1 2 5i-4-p-azidosalicylamidobutylamino-succinyl atractyloside), a permis de mettre en evidence au moins un site de fixation, sur le segment s212-e223 du transporteur anc2-ht. La deuxieme approche utilisee, la proteolyse limitee, a permis d'etudier les differences de conformation adoptees par le transporteur adp/atp au sein des complexes anc2-ht-catr et anc2-ht-ba, dans la membrane mitochondriale. L'accessibilite aux proteases de differentes regions du transporteur, sur les deux faces de la membrane, a revele certains elements de l'arrangement membranaire du transporteur anc2-ht dans chacune des conformations. A partir de l'ensemble de ces donnees, il est propose un modele d'arrangement du transporteur adp/atp dans la membrane mitochondriale, faisant apparaitre les regions flexibles, probablement impliquees dans le mecanisme du transport des adenine nucleotides lui-meme.