Recherche de nouveaux agents anticancéreux agissant par inhibition d'interaction protéine/protéine : caractérisation de leurs effets cellulaire
Institution:
Rennes 1Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
Misregulations of CDK5/p25 are implicated in neuronal diseases, as well as in the migration and the metastatic potential of cancer cells. Inhibitors of the CDK5/p25 complex, acting mainly via the ATP pocket of the kinase, have been described. However, this class of inhibitors is subjected to a selectivity problem because a lot of cellular proteins need ATP. We used the BRET (Bioluminescence Resonance Energy Transfer) method to discover new inhibitors of CDK5/p25 interaction. The originality of the assay developed lies in the cellular system used: the yeast Saccharomyces cerevisiae. Following the validation of the method developed, 5571 compounds have been screened. Three molecules were characterized and two of them were mainly studied, notably to understand their mode of inhibition, different from the ATP mimetic compounds.
Abstract FR:
Les dérégulations du couple protéique CDK5/p25 sont notamment impliquées dans des pathologies neuronales, ainsi que dans la migration et le potentiel métastasique de cellules tumorales. Des inhibiteurs du couple CDK5/p25 existent mais agissent majoritairement via l’obstruction de la poche à ATP de la kinase. Ceci est potentiellement à l’origine d’un problème de sélectivité puisque de nombreuses protéines cellulaires utilisent l’ATP. La technique BRET (Bioluminescence Resonance Energy Transfer) a été utilisée dans le but de découvrir de nouveaux composés inhibiteurs de cette interaction. L’originalité de la technique élaborée réside dans le choix du système cellulaire employé : la levure Saccharomyces cerevisiae. Suite à la validation de la méthode développée, 5571 composés ont été criblés. Trois molécules sont ressorties de ce criblage ; deux d’entre elles ont été principalement étudiées, notamment pour comprendre leur mode d’inhibition bien différent de celui des mimétiques de l’ATP.