Abstract FR:

L'arogénate deshydrogénase catalyse la réaction de décarboxylation oxydative de l'arogénate en tyrosine. Malgré l'importance de cette activité enzymatique chez les plantes, aucune arogénate déshydrogénase de plante n'avait été clonée ou purifiée au début de nos travaux. Notre étude a permis l'identification de deux gènes, notés tyrAAT1 et tyrAAT2, codant des arogénate deshydrogènase chez la plante modèle Arabidopsis thaliana. Une étude moléculaire et biochimique a montré que le produit du gène tyrAAT1 est constitué de domaines catalytiques très similaires et actifs séparément. Au contraire, le produit du gène tyrAAT2, comme toutes les préphénate et/ou arogénate deshydrogénases bactériennes actuellement identifiées n'est composé que par un seul domaine catalytique. L'étude de la localisation de ces deux isoformes chez Arabidopsis montre que ces deux gènes codent pour des enzymes plastidiales. Une étude biochimique réalisée à partir des protéines reombinantes TyrAAT1 et TyrAAT2 purifiées montre que les deux protéines possèdent des propriétés biochimiques proches et une étude in planta montre que les gènes tyrAAT1 et tyrAAT2 sont exprimés avec des abondances relatives proches dans tous les tissus étudiés. Une étude biochimique et structurale comparée entre les arogénate deshydrogénases d'Arabidopsis et de Synechocystis et la préphénate deshydrogénase de levure a été entreprise. Cette étude montre des mécanismes de régulation des enzymes différents permettant à ces organismes de mieux répondre aux besoins des cellules en acides aminés aromatiques. L'exploitation des connaissances acquises sur les activités préphénate et arogénate deshydrogénases a permis l'utilisation en transgenèse végétale de la préphénate deshydrogénase de levure afin de rendre les plantes tolérantes à des doses plus élevées en DKN.