Structure, biogenèse et expression de la protéine T du complexe de la glycine décarboxylase des plantes supérieures
Institution:
Université Joseph Fourier (Grenoble)Disciplines:
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Au cours de ce travail de these nous avons caracterise un adnc correspondant a la proteine t (1560 pb) du complexe de la glycine decarboxylase. Il possede un cadre de lecture ouvert de 1220 pb codant pour un peptide mature de 378 acides amines. La sequence primaire ainsi que la masse deduite (40 961 da) ont ete confirme respectivement par microsequencage et par mesure au spectrometre de masse. Dans la perspective d'une etude structurale, nous avons reussi a surexprimer chez e. Coli la proteine t en construisant un vecteur d'expression produisant un arnt rare chez les bacteries. L'etude de l'expression de la proteine t ainsi que de ses transcrits a montre qu'ils sont principalement presents dans les tissus folaires et semblent subir une forte induction a la lumiere. De plus, nous avons demontre que les transcrits correspondant aux proteines de la gdc (p, h et t) sont exprimes des le 4#i#e#m#e jours de developpement de la plante avec un pic au 7#i#e#m#e jour. . A ce stade, la faible representation des proteines de la gdc (p, h et t), suggere l'existence d'un controle post-transcriptionnel de l'expression de leurs genes. Nous avons egalement isole et sequence le gene codant pour la proteine t. Ce gene, compose de quatre exons, possede deux sites d'initiations dont l'un presente une sequence riche en pyrimidine proche de la sequence inr (initiator element). Enfin, l'analyse de la region promotrice a permis de caracteriser trois regions consensus qui semblent etre impliquees dans la regulation a la lumiere et dans la specificite tissulaire