Abstract FR:

L'adenyl cyclase est un composant essentiel de certains systemes de transduction. Nous avons cherche a caracteriser et a identifier une adenyl-cyclase de synaptosomes de cerveau de rat presentant une parente immunologique avec les adenyl-cyclases bacteriennes calmoduline dependantes de bordetella pertussis et bacillus anthracis. Ces toxines possedent entre elles trois courtes regions similaires. Grace a des anticorps polyclonaux obtenus contre les peptides correspondant a ces regions, nous avons pu identifier l'epitope responsable de la parente immunologique. Nous avons egalement montre que cet apitope (peptide b) correspond au site catalytique des toxines bacteriennes. Nous avons ameliore la purification de l'enzyme eucaryote par combinaison de deux etapes de chromatographie d'affinite: sur forskoline-agarose puis sur calmoduline-sepharose. La fraction finale a une haute activite specifique, 0,025 mmoles ampc/mg. Min, et contient deux proteines majoritaires dans les hauts poids moleculaires de 116 kda et 140 kda representant chacune environ 10% des proteines totales. Nous avons obtenu un anticorps monoclonal, mab 164, dirige contre le peptide b, qui inhibe partiellement l'activite adenyl-cyclase. Son activite specifique serait alors de l'ordre de 0,2 mmole d'ampc/mg. Min. Cette propriete ainsi que la presence d'un epitope egalement present dans le site catalytique des toxines bacteriennes, en font une adenyl-cyclase differente de celles dont les adnc ont jusqu'ici ete clones. L'identification definitive de l'adenyl-cyclase synaptosomale ne pourra etre donnee que par le clonage et l'expression de son adnc