Abstract FR:

Dans la plupart des cellules eucaryotes, l'inositol hexakisphosphate (insp#6, acide phytique) est le phosphoinositol le plus abondant. Chez l'amibe dictyostelium discoideum, la concentration d'insp#6 est de 0,7 mm et se maintient lors du cycle de differenciation de l'amibe. La fonction intracellulaire de cet inositol polyphosphate n'est pas clairement elucidee, toutefois un role regulateur de l'insp#6 dans le processus d'endocytose a recepteurs a ete propose chez les mammiferes. Un test de liaison de l'insp#6 radioactif a ete tout d'abord mis au point afin de pouvoir suivre les proteines capables de lier ce phosphoinositide, lors de purifications a partir d'extraits solubles de d. Discoideum. En combinant cette methode avec un test immunologique permettant de detecter les chaines lourdes des adaptines (proteines impliquees dans l'endocytose a recepteurs), le protocole de purification a permis de mettre en evidence cette proteine chez l'amibe. L'adaptine chez d. Discoideum ne semble pas fixer l'insp#6 contrairement a la situation dans les cellules de mammiferes. Une purification des proteines cytosoliques de liaison de l'insp#6 a permis l'identification de trois proteines non decrites jusqu'a present chez l'amibe : une nouvelle isoforme de cyclophiline et les proteines ribosomales s4 et s10. Le clonage de leur gene respectif ainsi que l'etude de leur expression au cours du developpement de l'amibe ont ete entrepris. Les trois genes sont specifiques du stade vegetatif : leur niveau de transcription s'effondre apres le commencement de la differenciation. La cyclophiline b purifiee est capable de lier la ciclosporine a et possede une extension n-terminale qui est clivee apres traduction de la proteine. Cette sequence signal permet son adressage vers le reticulum endoplasmique : la cyclophiline peut se trouver dans ce compartiment ou dans une vesicule de la voie de secretion, en effet aucun signal de retention dans le reticulum n'a ete trouve dans sa sequence. Une autre isoforme de cyclophiline localisee dans la mitochondrie a ete obtenue par chromatographie par affinite pour la ciclosporine a.