thesis

Caractérisation moléculaire et fonctionnelle d'une nouvelle famille de composants centrosomaux

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Jan. 1, 2004

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Abstract FR:

Le centrosome est le centre organisateur des microtubules des cellules animales. Les donnees moleculaires et fonctionnelles a son sujet ne cessent d'augmenter, cependant plusieurs de ses fonctions restent encore mal definies. Afin de participer a la comprehension de la structure et des fonctions du centrosome, nous avons realise la caracterisation moleculaire et fonctionnelle de nouveaux composants centrosomaux. Nous avons identifie et caracterise (structure introns/exons) les genes codant pour trois proteines jusqu'alors inconnues que nous avons nommees u1, u2 et u3. Les genes et les proteines u presentent de fortes homologies de structure et de sequence et coexistent dans differentes especes. Les proteines u possedent egalement comme signature caracteristique une richesse en residus tryptophane. Ces donnees nous laisse penser que ces proteines appartiennent a une meme famille. Nous avons par la suite produit des anticorps specifiques de chacune des proteines u. En immunofluorescence, les proteines u se localisent au centrosome au niveau du materiel pericentriolaire. Enfin, nous avons egalement etabli la localisation centrosomale de la proteine uh1 fusionnee avec la gfp. Nous avons par la suite realise une etude fonctionnelle des proteines u en inhibant leur expression par sirna. Cette inhibition entraine une forte mortalite cellulaire apoptotiqui quand les cellules sont en telophase. La mort cellulaire survient de deux facons differentes : les deux cellules filles meurent en meme temps, ou de facon asymetrique (une cellule fille meurt alors que l'autre peut initier une nouvelle division cellulaire). Les proteines u interviendraient donc dans la division cellulaire.