Caractérisation de la voie Wnf/β-caténine durant la différenciation gonadique chez la truite arc-en-ciel, Oncorhynchus mykiss
Institution:
Rennes 1Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
The embryonic gonad is able to differentiate into two very different structures, the testis and the ovary, and this process is under the control of multiple signalling pathways. In mammals, the Wnt/ ß-Catenin pathway plays a major role in ovarian differentiation, through the action of Wnt4, Rspo1, and a gene that acts downstream of this pathway, Follistatin. The aim of the work presented in this thesis was to characterize the expression of molecular actors of this pathway, and to study the potential implication of the Wnt/ ß-Catenin pathway during gonadal differentiation in the rainbow trout, Oncorhynchus mykiss. Particular attention was paid to the wnt4 gene, and three paralogs were identified in rainbow trout. Wnt4a1 and Wnt4a2 proteins share high identity with other vertebrate Wnt4 proteins, whereas the teleost fish specific sequence Wnt4b is clearly more divergent, and seemed to have sub-functionalized in the nervous system development. Analysis by real-time PCR and in situ hybridization showed that wnt4a1/2 and rspo1 genes are not overexpressed in the ovary during gonadal differentiation, in contrast to the transcription factor tcf7. The follistatin gene (fst) is expressed in the same cells than cyp19a1a, a key gene in ovarian differentiation, that is necessary for estrogen synthesis. It is so far the earliest genes that display a sexually dimorphic expression in the ovary. Inhibition of the Wnt pathway during ovarian differentiation leads to a decreased expression of fst and cyp19a1a. These results therefore suggest an involvement of the Wnt / ß-catenin in ovarian differentiation in rainbow trout.
Abstract FR:
La gonade embryonnaire a la capacité de se différencier en deux structures très différentes, le testicule et l'ovaire, grâce à l'intervention de différentes voies de signalisation. Chez les mammifères, la voie Wnt/ß-Caténine joue un rôle majeur dans la différenciation ovarienne, notamment via Wnt4, Rspo1, et un gène-cible de cette voie, la Follistatine. L'objectif de mon travail de thèse était de caractériser l’implication potentielle de cette voie de signalisation au cours de la différenciation gonadique de la truite arc-en-ciel, Oncorhynchus mykiss. Une attention particulière a été portée au gène wnt4. Trois paralogues ont été identifiés chez la truite: Wnt4a1 et Wnt4a2, fortement conservés avec les séquences Wnt4 des autres vertébrés, et Wnt4b, une forme divergente, qui semble s’être sous-fonctionnalisée dans le développement du système nerveux. L'analyse par PCR en temps réel et par hybridation in situ a montré que les gènes wnt4a1/2 et rspo1 ne sont pas surexprimés dans l'ovaire en cours de différenciation, contrairement au facteur de transcription tcf7. Le gène de la follistatine (fst) s'exprime de façon très précoce dans l'ovaire, dans les mêmes cellules que cyp19a1a, un gène-clé de la différenciation ovarienne, nécessaire pour la synthèse des oestrogènes. Ce sont à ce jour les gènes qui présentent un dimorphisme sexuel le plus précoce dans l'ovaire. L'inhibition de la voie Wnt durant la différenciation ovarienne conduit à une diminution de l'expression de fst et de cyp19a1a. Ces travaux suggèrent donc une implication de la voie Wnt/ß-Caténine dans la différenciation ovarienne chez la truite arc-en-ciel.