Abstract FR:

Les polyamines sont des molecules dont le role biologique est incontestable. Leur petite taille, leur structure polycationique, leur solubilite et leur absence de caracteristique optique particuliere rendent cependant leur etude in situ tres delicate. Or la comprehension de leurs fonctions cellulaires necessite une connaissance precise de leur localisation. En l'absence de sondes specifiques, les anticorps anti-polyamine representent les seuls outils disponibles pour aborder la question de la localisation cellulaire et tissulaire des polyamines. Les travaux presentes dans ce memoire ont eu quatre objectifs : 1) caracteriser la specificite et la structure de l'anticorps anti-spermine spm8-2. En particulier, la structure du paratope de l'anticorps a ete etudiee par modelisation moleculaire et modifications chimiques specifiques de residus acides amines. 2) developper un test de polarisation de fluorescence (fpia) pour les anticorps anti-polyamines. Nous avons evalue le potentiel de derives dansyles de polyamine comme sondes fluorescentes pour le criblage et l'etude de l'activite d'anticorps anti-polyamine dans un test fpia. 3) produire de nouveaux anticorps anti-polyamines. Nos essais infructueux pour obtenir des anticorps plus specifiques et plus avides par la technique classique des hybridomes et la technique des librairies combinatoires sont rapportes. 4) etudier le potentiel des anticorps anti-polyamine pour l'etude des polyamines et comme outil clinique : par cytometrie de flux, nous avons montre que l'anticorps spm8-2 permet l'analyse de la compartimentalisation des polyamines dans les cellules, nous avons evalue le potentiel de l'anticorps spm8-2 pour la visualisation de tumeurs chez l'animal par immunoscintigraphie, nous avons etudie l'immunoreactivite des polyamines d'une collection de tumeurs de prostate humaine. La valeur clinique de ce test est discutee.