Abstract FR:

La technique de micro-injection des spermatozoides humains sous la pellucide (suzi) des ovocytes de hamster est developpee afin d'etudier le pouvoir fecondant des spermatozoides humains et de proceder a l'analyse de leur caryotype. L'analyse de l'interaction gametique apres micro-injection de plusieurs milliers d'ovocytes dans differentes conditions environnementales a mis en evidence la relation existant entre la dynamique de la reaction acrosomiale et la capacite des spermatozoides a fusionner avec l'ovocyte. D'autre part la selection de sous populations spermatiques presentant differents etats acrosomiques et pouvoirs fecondants a ete obtenue par centrifugation sur gradient de percoll. Une technique originale d'induction de la reaction acrosomiale par l'ionophore calcique a23187 est proposee pour apprecier le pouvoir fusiogene des spermatozoides humains apres micro-injection. Le pouvoir fusiogene des spermatozoides humains micro-injectes sous la pellucide a ete compare dans les modeles heterospecifique et homospecifique. La valeur predictive de la suzi-hamster pour la suzi humaine est discutee. La maitrise des parametres de la fecondation apres suzi-hamster a permis de realiser l'analyse des spermatozoides micro-injectes. Chez deux sujets temoins, 72 metaphases interpretables de spermatozoides ont ete obtenus. Cependant la suzi se revele etre une technique moins performante pour l'analyse cytogenetique des spermatozoides humains que la technique conventionnelle d'insemination des ovocytes depellucides. Elle semble donc difficilement applicable aux sujets dont la spermatogenese est deficiente. De facon concomitante, l'analyse cytogenetique des spermatozoides d'un patient porteur d'un syndrome de klinefelter en mosaique (46,xy/47,xxy) a ete realisee par la technique conventionnelle d'insemination in vitro des ovocytes depellucides de hamster. 543 caryotypes spermatiques ont ete obtenus. Un taux significativement augmente de spermatozoides 24,xy a ete mis en evidence, suggerant que les cellules germinales de la lignee 47,xxy seraient aptes a franchir toutes les etapes de la meiose