Caractérisation et rôle des isoformes de la triadine dans la physiologie des cellules musculaires
Institution:
Université Joseph Fourier (Grenoble)Disciplines:
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Au cours de cette étude, j'ai recherché quel était le rôle des différentes isoformes de la triadine, Trisk 95, Trisk 51, Trisk 49 et Trisk 32 dans les cellules musculaires. Dans un premier temps, j'ai étudié le rôle des triadines Trisk 95 et Trisk 51. Pour se faire, j'ai induit leur surexpression grâce à des vecteurs viraux, soit dans des cultures primaires, soit chez la souris nouveau-née. Trisk 95 et Trisk 51 sont associées au RyR et la surexpression de Trisk 95 peut bloquer la libération de calcium induite par dépolarisation, alors que dans les mêmes conditions, la surexpression de Trisk 51 n'a pas d'effet. J'ai aussi étudié l'effet de la surexpression de Trisk 95 sur l'entrée capacitive, qui est le mécanisme par lequel une entrée de Ca2+ extracellulaire sera induite pour remplir les stocks intracellulaires vidés. La surexpression de Trisk 95 diminue l'entrée capacitive dans des cultures primaires. La surexpression à long terme de Trisk 95 et Trisk 51 chez l'animal n'a que peu d'effet sur les autres protéines du complexe de mobilisation du Ca2+. Par contre, elle perturbe la localisation de la cavéoline-3, une protéine de structure impliquée dans la formation des triades. Dans un second temps, j'ai caractérisé la localisation et les partenaires de Trisk 49 et de Trisk 32 par des marquages immunofluorescents et de la microscopie confocale. Ces deux isoformes ne sont pas localisées à la triade. Les expériences d'immunoprécipitation montrent que Trisk 32 pourrait à la fois être associée au RyR et à un autre type de canal intracellulaire de libération de Ca2+, le récepteur de l'inositol 1,4,5-tris-phosphate (IP3R). Ainsi, les triadines pourraient constituer une famille de protéines, impliquées dans la régulation de différents types de canaux intracellulaires, et pourraient jouer un rôle dans la formation et le maintien de certains compartiments du RS.