Abstract FR:

Les microtubules assurent de nombreuses fonctions essentielles dans la cellule. La concentration en dimère de tubuline libre, la brique de base de microtubules, influe trsè fortement sur l'assemblage et la dynamique des microtubules. Les protéienes interagissant directement avec des microtubules et/ou le dimère de tubuline sont des effecteurs reconnus de cette dynamique. Notre objectif a été d'identifier de manière systématique toutes les protéines liant le dimère de tubuline sous sa forme native. Pour cela, nous avons développé une stratégie basée sur une colonne de chromatographie couplée à un mode d'identification des protéines par spectrométrie de masse. L'identification de protéines déjà connues pour interagir directement avec la tubuline permet de valider notre approche. D'autres protéines, déjà connues pour interagir avec les microtubules, sont identifiées comme liant le dimère tubuline. Nous montrons dans cette étude que l'orthologue de TOGp chez le Xénope, la protéine XMAP15, lie le dimère de tubuline, suggérant un rôle plus large que celui de reconnaître la structure microtubulaire. Nous avons isolé de nombreuses protéines chaperons. Nous montrons qu'il n'y a pas d'interaction direce, in vitro, entre Hsc70 et le dimère de tubuline et/ou les microtubules et qu'elle n'affecte pas l'assemblage des microtubules, suggérant un lien indirect avec les microtubules dans les cellules. Nous avons aussi identifié des protéines connues pour avoir un lien indirect avec les microtubules. Enfin, des protéines identifiées n'étaient pas connues pour interagir avec la tubuline comme l'adénosine déaminase, l'ATP-citrate-lyase, ACPC2 et LRP130.