Caractérisation de marqueurs reflétant la qualité ovocytaire au cours de la folliculogenèse in vitro chez la souris : exemple de la phospholipase Cβ1
Institution:
Paris 6Disciplines:
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La croissance folliculaire in vitro a été développée dans le but de permettre le développement et la fécondation d’ovocytes issus de follicules immatures. Cette technique de folliculogenèse in vitro pourrait être utilisée en médecine de la reproduction, pour restaurer la fertilité des patientes ayant bénéficié d’une cryoconservation de cortex ovarien. Plusieurs systèmes de culture permettant la croissance in vitro de follicules à différents stades de leur développement ont été mis au point chez la souris et ont permis la naissance de souriceaux. Actuellement, la souris est le seul modèle pour lequel une croissance folliculaire complète suivie de naissances est possible in vitro. Malgré de nombreuses différences dans la physiologie ovarienne entre humains et rongeurs, les souris constituent un modèle approprié pour l’étude de mécanismes moléculaires contrôlant le développement folliculaire. L’objectif de ce travail a été d’étudier la localisation de la PLCβ1 au cours de la croissance folliculaire in vitro chez la souris. La PLCβ1 est une enzyme responsable de la formation d’IP3 et de DAG, qui active la PKC induisant la transition de MI à MII. Nous avons étudié les relations entre la distribution nucléo-cytoplasmique de la PLCβ1 et la capacité de l’ovocyte à réinitier sa méiose. Nous avons corrélé localisation de la PLCβ1, configuration de la chromatine et diamètre ovocytaire au cours du développement in vivo et in vitro (avec et sans congélation) des follicules et montré l’existence d’une forte corrélation entre ces trois paramètres. En utilisant un inhibiteur de la PLC, nous avons suggéré que la distribution de la PLCβ1 jouait probablement un rôle dans la maturation. La maturité ovocytaire est associée à une PLCβ1 cytoplasmique, un grand diamètre et à une configuration sub nucléolaire de la chromatine. Ces résultats permettent de définir un nouveau marqueur, reflet de la bonne qualité ovocytaire.