Abstract FR:

Le but de ce travail etait double : 1) mettre au point un modele d'angiogenese in vitro reproductible, rapide et quantifiable ; 2) caracteriser a l'aide de ce modele des facteurs impliques dans l'angiogenese. Nous avons etabli le modele sur matrice de fibrine. Nous avons analyse le role de la concentration du gel de fibrine (un des parametres determinant la malleabilite) dans l'induction de l'angiogenese. Les conditions de culture qui permettent d'obtenir un reseau de pseudo-capillaires sont les suivantes : 1,5. 10#5 cellules/ml ensemencees sur fibrine (0,5 mg/ml), dans un milieu contenant 2% en serum. Ces conditions permettent d'observer la reorganisation des cellules en un reseau de pseudo-capillaires entre 24 et 48 heures de culture. A l'aide de ce modele, nous montrons que les cellules degradent la matrice au cours de la reorganisation en pseudo-capillaires, et que la degradation est correlee dans le temps aux changements morphologiques des cellules. Ce remodelage par la fibrinolyse conditionne la formation des pseudo-capillaires puisque les anti-fibrinolytiques inhibent totalement leur formation. L'expression de tous les composants du systeme activateurs du plasminogene/plasmine est augmentee. L'integrine v3 est localisee dans des points de contact lorsque la cellule commence a adherer sur fibrine, puis devient diffuse lorsque le pseudo-capillaire est forme. Nous montrons que l'expression membranaire de l'v3 diminue au cours de la formation du capillaire. Nous mettons egalement en evidence que les cellules secretent du tgf-1 au cours du processus. Le role eventuel de cette cytokine reste a mettre en evidence. La morphogenese dans ce modele est sous controle d'au moins quatre facteurs : les facteurs mecaniques, les proteases, les integrines et les cytokines. Ce systeme peut etre utilise : -d'une part pour etudier comment ces facteurs interagissent lors de la morphogenese capillaire ; -d'autre part pour tester des regulateurs de l'angiogenese.