Etude des mécanismes de l'endocytose chez Dictyostelium discoideum : caractérisation des effets inhibiteurs de la caféine et de la cycloheximide, analyse du pH endosomal
Institution:
Université Joseph Fourier (Grenoble)Disciplines:
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Les mecanismes de l'endocytose chez l'amibe dictyostelium discoideum ont ete etudies par la caracterisation des effets inhibiteurs de la cafeine (une trimethylxanthine) et de la cycloheximide (un inhibiteur de la synthese proteique chez les cellules eucaryotes) qui ne modifient pas le metabolisme energetique de la cellule. La cafeine inhibe la pinocytose de phase-fluide, la secretion des enzymes lysosomales et la phagocytose chez dictyostelium. L'hypothese postulee pour expliquer l'effet inhibiteur est une decharge des reservoirs de ca#2#+ sensibles a la cafeine. La cycloheximide bloque aussi toutes les voies endocytaires chez dictyostelium. Chez un mutant resistant a la cycloheximide (cyc a1), tous les phenomenes endocytaires sont resistants a l'action de cet antibiotique. D'autres inhibiteurs de la synthese proteique: l'anisomycine, l'emetine, la pactamycine et la puromycine inhibent aussi l'endocytose. L'inhibition de l'endocytose par les inhibiteurs de la synthese proteique pourrait etre le resultat de l'inhibition de la synthese d'une proteine indispensable qui possede une vitesse de renouvellement rapide ou d'un mecanisme regulateur lie a un changement de l'etat de phosphorylation des proteines. Le fitc-dextran utilise comme sonde de ph a permis de mesurer le ph du compartiment endosomal chez dictyostelium. Un compartiment majeur a ph 5,8#0,2 a ete detecte et reste constant lors d'une carence nutritive. L'evolution du signal de fluorescence du fitc-dextran pendant les etapes precoces de l'exocytose apporte des evidences de l'existence d'un compartiment endocytaire plus acide (ph<5,8) que le compartiment endosomal majeur