thesis

Contribution à l'étude du métabolisme énergétique et carbone dans des mitochondries de semences de tournesol en germination

Defense date:

Jan. 1, 1991

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Institution:

Bordeaux 2

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Quelques proprietes des mitochondries de semences de tournesol (helianthus annuus, l. ) ont ete etudiees dans le but de preciser le mecanisme de la production d'atp qui se declenche des l'imbibition des semences et se poursuit pendant la germination. Des mitochondries purifiees ont ete obtenues apres centrifugation sur gradient de percoll a partir de semences imbibees pendant des temps variables puis a partir de semences seches. Les mitochondries de semences seches possedent une structure atypique qui evolue vers un aspect plus classique au cours de l'imbibition. Malgre leur aspect atypique, les mitochondries de semences seches sont capables d'assurer l'oxydation phosphorylante. Ce mecanisme a ete caracterise par l'effet d'inhibiteurs specifiques de diverses etapes de l'oxydation phosphorylante. Ce resultat confirme et precise des resultats obtenus auparavant in vivo, et leur ensemble constitue une demonstration que l'oxydation phosphorylante est le principal mecanisme assurant la regeneration de l'atp dans les semences en germination, et ceci, des l'imbibition des tissus. L'etude de l'oxydation de differents acides organiques a montre que ces mitochondries possedent les activites enzymatiques necessaires au fonctionnement du cycle de krebs. Elles possedent la capacite d'oxyder le citrate, mais aussi, et avec une meilleure efficacite l'isocitrate et l'-cetoglutarate. Ce resultat est discute dans un contexte metabolique ou le citrate oxyde dans le cycle de krebs est produit pour la plus grande part dans les peroxysomes, et non dans les mitochondries, et ou il peut etre transforme en isocitrate et en -cetoglutarate dans le cytosol avant d'acceder a la mitochondrie. Ces travaux ont amene a caracteriser une isocitrate deshydrogenase a nadp mitochondriale. Cette enzyme a ete distinguee par ses proprietes electrophoretiques et immunologiques de l'iso-enzyme cytosolique, et il a ete montre que cette activite n'etait pas due a la contamination de la fraction mitochondriale par d'autrs compartiments cellulaires. Quelques-unes de ses proprietes cinetiques ont ete determinees