thesis

Etudes électrophysiologiques et pharmacologiques des récepteurs glutamatergiquesmétabotropes et ionotropes du système nerveux central des invertébrés

Defense date:

Jan. 1, 2000

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Institution:

Angers

Disciplines:

Directors:

Abstract EN:

Using the intracellular double-microelectrode technique and the patch-clamp technique, it was possible to study the glutamatergic receptors expressed in the xenopus oocyte and those present on the membrane of isolated neurons called dorsal unpaired median (dum) neurons of the cockroach periplaneta americana. The co-expression in the xenopus oocyte of the metabotropic glutamatergic receptor dmglura from the Drosophila melanogaster central nervous system and the human and mouse girk channels was studied and shown to be activated by glutamate and ly354740, and blocked by two group ii metabotropic glutamatergic receptor antagonists, mccg and apica. The coupling of this receptor to girk channels is via a pertussis toxin-sensitive g protein. The existence of a glutamatergic receptor was also revealed on dum neurons. In this study, two inward currents activating for hyperpolarisations were characterised. An irk inward current sensitive to cscl, bacl 2 and tea and a calcium ion dependent chloride inward current. This current is blocked by intracellular sits and dids and by zncl 2. It is blocked in the presence of intracellular bapta and an extracellular solution devoid of calcium ion. The metabotropic glutamatergic receptor may be coupled to irk-type channels. Two ionotropic chloride ion-dependent receptors (glucl), one sensitive and the other resistant to picrotoxin (ptx), were also characterised. The ptx-sensitive receptor was blocked by bidn and fipronil and activated by ibotenate. These results are different from those obtained after expression in the xenopus oocyte of the glucl receptor (glc-3) from the nematode caenorhabditis elegans. The latter is insensitive to picrotoxinin but is blocked by bidn and fipronil.

Abstract FR:

L'utilisation de la technique de double-microélectrodes intracellulaires et de la technique de patch-clamp a permis d'étudier les récepteurs glutamatergiques exprimes dans l'ovocyte de xénope et ceux présents sur la membrane de neurones isolés appelés dorsal unpaired median (dum) neurones de la blatte périplaneta americana. L'étude de la co-expression dans l'ovocyte de xénope du récepteur glutamatergique métabotrope dmglura issu du système nerveux central de la drosophile drosophila melanogaster et des canaux girk d'humain et de souris a montré qu'il est activé par le glutamate et le ly354740, et bloque par deux antagonistes des récepteurs glutamatergiques métabotropes du groupe ii, le mccg et l'apica. Le couplage de ce récepteur aux canaux girk se fait via une protéine g sensible à la toxine pertussique l'existence d'un recepteur glutamatergique a ete aussi revelee sur les dum neurones. Lors de cette étude, deux courants entrants s'activant pour des hyperpolarisations ont été caractérisés. Un courant entrant irk sensible au cscl, au bacl 2 et au tea et un courant entrant chlorure dépendant des ions calcium. Ce courant est bloque par le sits et le dids intracellulaires et par le zncl 2. Il est bloqué en présence de bapta intracellulaire et d'une solution extracellulaire dépourvue d'ion calcium. Le récepteur glutamatergique métabotrope, pourrait être couple aux canaux de type irk. Deux récepteurs ionotropes dépendants des ions chlorures (glucl) l'un sensible et l'autre résistant a la picrotoxine (ptx) ont été aussi caractérisés. Le récepteur sensible a la ptx est bloque par le bidn et le fipronil et active par l'ibotenate. Ces résultats sont différents de ceux obtenus après expression dans l'ovocyte de xénope du récepteur glucl (glc-3) issu du nematode caenorhabditis elegans. Ce dernier est insensible a la picrotoxinine mais est bloqué par le bidn et le fipronil.