Abstract FR:

Les cellules souches assurant le developpement, le renouvellement et la reparation de l'epithelium respiratoire ne sont a ce jour pas caracterisees. Notre travail est consacre a l'etude de ces cellules chez l'homme, et repose sur l'utilisation du modele de greffes tracheobronchiques ftales humaines dans la souris xenotolerante scid. Dans l'hote, les tissus ftaux se developpent en voies aeriennes differenciees et sont tapissees par un epithelium pseudostratifie exprimant l'ensemble des marqueurs de differenciation. Dans le modele de la souris scid-hu, nous avons developpe un test fonctionnel des progeniteurs epitheliaux respiratoires. Apres son ablation totale, l'epithelium des greffes n'est jamais regenere de facon endogene. En revanche, l'ensemencement dans des structures denudees de cellules epitheliales differenciees conduit a la reconstitution d'un epithelium mature. Celui-ci est egalement regenere a partir de cellules issues de l'ebauche respiratoire endodermique precoce qui representent une population homogene de cellules epitheliales precurseurs. Parallelement, nous avons identifie des molecules differemment distribuees entre les cellules epitheliales apicales, ciliees et secretoires, et les cellules basales. Ces deux sous-populations triees par cytometrie en flux ont ete ensemencees dans notre modele. Toutes deux reconstituent une structure epitheliale apres 4 semaines dans l'hote, mais seules les greffes ensemencees avec les cellules basales presentent encore un epithelium apres 3 mois de developpement. La population de cellules basales semblent donc posseder les cellules souches de l'epithelium respiratoire humain. Enfin, nous avons realise le transfert d'un gene marqueur par voie lentivirale dans les xenogreffes proximales et distales. L'ensemble de ces resultats ouvrent de nombreuses perspectives quant a la caracterisation des cellules souches respiratoires humaines et dans le cadre de la therapie cellulaire et genique de la mucoviscidose. Une structure epitheliale apres 4 semaines dans l'hote, mais seules les greffes ensemencees avec les cellules basales presentent encore un epithelium apres 3 mois de developpement. La population de cellules basales semblent donc posseder les cellules souches de l'epithelium respiratoire humain. Enfin, nous avons realise le transfert d'un gene marqueur par voie lentivirale dans les xenogreffes proximales et distales. L'ensemble de ces resultats ouvrent de nombreuses perspectives quant a la caracterisation des cellules souches respiratoires humaines et dans le cadre de la therapie cellulaire et genique de la mucoviscidose.