Recherche de proteines associees a la morphodynamique de l'appareil de golgi dans les cellules vegetales
Institution:
Paris 11Disciplines:
Directors:
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Abstract FR:
L'objectif de ce travail est d'identifier des proteines associees a la morphodynamique de l'appareil de golgi dans les cellules vegetales. Trois groupes de proteines ont ainsi ete etudies : 1) des proteines associees aux membranes golgiennes. Nous definissons deux anticorps monoclonaux, mac254 et mac266, comme des marqueurs du golgi a l'echelle optique. Une etude comparative avec jim84, seul monoclonal reconnu comme marqueur du golgi, montre que tous ces anticorps decrivent differentes sous-familles de proteines portant toutes des branchements sucre de type lewis a. De plus, un marquage differentiel de surfaces cellulaires suggere une regulation de l'exportation des proteines reconnues fonction de l'environnement cellulaire. 2) des proteines candidates a la regulation du mouvement des unites golgiennes dans le cytoplasme. Nous avons initie une etude sur les proteines rho et les proteines de type myosine et spectrine qui pourraient jouer un role entre la dynamique de l'actine et les mouvements golgiens. Les resultats ne permettent pas d'identifier de myosine ou de spectrine participant au mouvement golgien. Ils soulignent la difficulte d'etudier les proteines rho par des approches classiques de toxines. Par contre ils indiquent qu'une petite proteine de 18 kda reconnue par les anticorps animaux anti-rac1 est associee aux membranes golgiennes, probablement par la face cis du golgi. 3) un complexe proteique, le coatomere, connu dans la cellule animale pour initier le bourgeonnement de vesicules mantelees de type copi a partir des membranes golgiennes. Nous avons mis en evidence une proteine de 100 kda reconnue par des anticorps anti--cop, associee aux membranes golgiennes. Une analyse par spectrometrie de masse definit cette proteine comme une -cop vegetale. Au moins deux autres proteines, qui pourraient etre associees a -cop et former un complexe de type coatomere, ont ete visualisees : -cop et -cop. Enfin la surexpression de arf1, petite proteine g en charge du recrutement du coatomere sur la membrane golgienne, retarde notamment son developpement. Une quatrieme partie reprend ces experiences dans un modele cellulaire a croissance apicale, le tube pollinique. Ces donnees sont discutees dans le contexte de la regulation de la morphodynamique du golgi.