Nouvelles approches concernant la realisation d'immunocapteurs et de biocapteurs enzymatiques a l'aide d'electrodes serigraphiees a base de carbone
Institution:
Clermont-Ferrand 2Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
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Abstract FR:
Les electrodes serigraphiees (spes), qui sont a usage unique et faciles a produire en masse a moindre cout, sont des outils attrayants pour developper des biocapteurs electrochimiques. Tout d'abord, nous avons construit un immunocapteur magnetique in situ en combinant des microbilles immunomagnetiques a la technique sensible de detection voltammetrique par echange d'ions d'un produit genere par un marqueur enzymatique a l'aide d'une spe recouverte par un film de nafion. Cette approche offre une amplification significative de la reponse analytique et permet d'atteindre une limite de detection en 2,4-d, un herbicide, 70 fois inferieure a celle obtenue avec un kit elisa colorimetrique commercialise. Ensuite, nous avons mis au point une methode simple et efficace de fixation covalente de la biotine a la surface de l'electrode via l'electrodeposition d'un sel de diazonium. Ces electrodes biotinylees, une fois combinees avec l'avidine, constituent une veritable plate-forme universelle pour construire un large eventail de biocapteurs amperometriques. La peroxydase de raifort, utilisee lors de la caracterisation de ces surfaces greffees, a conduit a des resultats voltammetriques revelant un mecanisme catalytique complexe. Des recherches plus fondamentales ont permis d'elucider partiellement le mecanisme intime de l'enzyme. Enfin, nous nous sommes interesses a l'utilisation d'un colloide d'or comme marqueur en immunoelectroanalyse. Nous avons imagine un concept de detection a la fois sensible et original qui repose sur la dissolution chimique en milieu oxydant des particules metalliques sous forme d'ions, qui une fois liberes, sont detectes en voltammetrie par redissolution anodique. Cette approche a ete appliquee a l'immunodosage non competitif d'une immunoglobuline g. Avec une limite de detection de 0,5 ng. Ml 1, cette methode est aussi performante que certains dosages elisa ou immunodosages bases sur la detection de chelats d'europium par fluorescence.