Abstract FR:

Nous nous sommes interesses a la recherche et a la caracterisation de serine/threonine kinase(s), regulee(s) par les recepteurs tyrosine kinases et phosphorylee(s) sur tyrosine. L'utilisation de fibroblastes de souris exprimant le recepteur humain de l'insuline, incubes en presence d'insuline ou d'orthovanadate de sodium, nous a permis d'observer au moins trois activites serine kinases de 30 kd environ (determine par filtration sur gel), phosphorylees sur tyrosine et tres probablement regulees par cette phosphorylation. Nous avons ensuite etudie le mode d'activation d'erk1, une map-kinase de 44 kd. Apres immunopurification de la proteine, nous avons mis en evidence sa phosphorylation in vitro sur threonine et tyrosine, ainsi qu'une stimulation concomitante de son activite mbp-kinase. Ces donnees nous ont permis de proposer que l'autophosphorylation pouvait etre un mecanisme possible de stimulation et/ou d'amplification de l'activite map-kinase. Nous avons ensuite observe la coprecipitation avec erk1 d'une proteine de 90 kd environ, phosphorylee sur threonine et sur serine en systeme acellulaire en presence d'erk1, et sur serine exclusivement (par un mecanisme d'autophosphorylation) apres separation d'erk1. Nous avons enfin etabli qu'il s'agissait de l'homologue mammifere de la s6-kinase ii de xenope, demontrant ainsi l'association dans la cellule intacte entre les deux proteines