Abstract FR:

L'acetylcholinesterase (ache) est l'enzyme chargee de la terminaison de l'influx nerveux dans l'espace synaptique des especes d'invertebres et de vertebres. Etant donne le role cle de cette enzyme dans la survie de l'organisme, elle est devenu la cible des molecules inhibitrices. Parmi ces inhibiteurs on compte les insecticides organophosphores et carbamates largement utilises pour le controle d'insectes ravageurs. Les connaissances sur l'enzyme d'invertebre obtenues jusqu'a maintenant proviennent entre autres des experiences de mutagenese dirigee concues a partir de la comparaison de son structure avec celle obtenu par cristallographie de l'enzyme de vertebre (torpedo californica). Etant donne que l'enzyme d'invertebre presente un comportement cinetique different de celui montre par l'enzyme de vertebre et que la modification de l'enzyme d'insecte constitue un mecanisme de resistance aux insecticides, il est important de decrire la structure cristalline de l'ache d'insecte pour permettre une meilleur comprehension des ses particularites fonctionnelles. Dans cette etude nous utilisons comme modele l'enzyme de drosophila melanogaster exprimee dans un systeme recombinant. Pour faciliter la cristallisation de la proteine recombinante de drosophile nous avons exprime des proteines mutees simplifiees. D'autres modifications ont ete concues pour comprendre le mecanisme cinetique de l'enzyme. Dans des fins biotechnologiques nous avons egalement concue et produit des proteines avec une sensibilite augmentee aux insecticides. Nous utilisons egalement des proteines mutees pour analyser le role des mutations dans la resistance de l'ache aux insecticides.