Abstract FR:

Nous avons mis au point une méthode de production d'embryons porcins in vitro, qui permet à 20% des ovocytes de truies prepubères d'atteindre le stade de blastocyste, et des porcelets sont nés âpres transfert de ces embryons. Le contrôle de paramètres comme la concentration en spermatozoïdes, le nombre de spermatozoïdes capacités ou la durée de la fiv sont un moyen nécessaire mais pas suffisant pour limiter la polyspermie. En effet, la qualité des ovocytes représente une source importante de variabilité. Le défaut de différenciation des ovocytes issus d'animaux prepuberes par rapport à des ovocytes issus d'adultes se traduit principalement par une baisse de la sensibilité au fluide folliculaire, à la fsh et à l'egf. Ils sont plus susceptibles à la polyspermie après fiv et possèdent une compétence au développement inférieure. La compétence au développement est acquise progressivement au cours de la croissance folliculaire, après la compétence à la méiose et avec une cinétique variable d'un follicule à l'autre. La production d'embryons se fait donc au départ d'une population d'ovocytes très hétérogène, beaucoup étant prives d'une phase cruciale de différenciation terminale. Une étape de culture préalable à la maturation pourrait permettre à ces ovocytes d'achever leur différenciation in vitro. La roscovitine, un inhibiteur spécifique des cdks, a été utilisée pour empêcher la reprise de méiose des ovocytes in vitro. Cette inhibition est totalement réversible en présence d'egf et de fsh, c'est à dire dans nos conditions de maturation. Des phénomènes de la maturation cytoplasmique sont également inhibés de manière réversible comme en témoigne le suivi des ne synthèses protéiques. La roscovitine protège les ovocytes contre des mécanismes du vieillissement responsables de la perte de la compétence au développement. Nous avons enfin utilisé ce modèle d'inhibition de la reprise de méiose pour étudier l'action de l'egf et de la fsh sur la maturation nucléaire.