Abstract FR:

Le mecanisme de l'activation auto-catalytique du mpf (m-phase promoting factor ou cdc2 kinase), responsable de l'entree en division, reste mal compris. L'enzyme responsable de l'activation du mpf, la phosphatase xcdc25c, subit une phosphorylation activatrice juste avant la rupture de l'enveloppe nucleaire. L'une des kinases responsable de cette etape est la kinase cdc2. L'existence du retrocontrole positif de cdc2 sur son activateur assure l'irreversibilite de l'entree en phase m et explique en partie le caractere auto-catalytique du mpf. L'evenement initial qui declenche la boucle d'amplification du mpf, et sa regulation par la voie de transduction lancee par la progesterone, ne sont pas connus. Notre objectif etait d'etudier les mecanismes moleculaires qui controlent l'initiation de l'auto-amplification du mpf. Nous avons montre que le mecanisme d'auto-amplification du mpf se decompose in vitro en deux etapes : - lors d'une premiere etape, xcdc25c acquiert une activite phosphatasique de base et commence a dephosphoryler, et donc a activer, de maniere lineaire quelques molecules de cdc2. En presence d'atp, cdc2 actif catalyse la phosphorylation partielle de xcdc25c. L'activation de la kinase cdc2 reste lineaire, xcdc25c partiellement phosphoryle et la boucle d'amplification ne se met pas en place. La kinase plx1 est activee, mais elle n'est pas necessaire lors de cette premiere etape. - l'inhibition de la phosphatase 2a permet la realisation d'une deuxieme etape lors de laquelle xcdc25c est hyper-phosphoryle, en presence des kinases cdc2 et plx1 deja actives. La phosphatase xcdc25c hyper-phosphorylee catalyse l'activation brutale de la kinase cdc2 (cinetique du tout-ou-rien) de maniere dependante de l'adaptateur suc1/cks. L'auto-amplification du mpf est alors mise en marche.