Abstract FR:

Les regions terminales (les telomeres) des chromosomes de la plupart des organismes sont essentielles au maintien de l'integrite des chromosomes et sont impliquees dans la cancerogenese et le vieillissement cellulaire. In vitro, chaque brin s'organise en une structure repliee, le quadruplexe de guanines pour l'un, le motif i constitue de paires de cytosines protonees, pour l'autre, ce qui pose la question du role biologique de ces structures. Nous avons voulu contribuer a la comprehension des mecanismes de regulation des telomeres en recherchant si des proteines pouvaient se lier specifiquement a une sequence d'adn telomerique riche en cytosines. Cette etude a ete conduite sur la levure saccharomyces cerevisiae. Nous avons prealablement montre, par rmn et par spectroscopie d'absorption, que le fragment d'adn telomerique de levure d(c 3aca) 3c 3 pouvait former un motif i in vitro. La formation d'un complexe adn-proteine a ete observee par migration electrophoretique non denaturante et la masse moleculaire ( 250 kda) a ete determinee par passage sur tamis moleculaire. L'association adn-proteine est assez selective et toutes les sequences d'oligomeres testees formant in vitro un motif i monomerique entrent en competition avec la sequence d(c 3aca) 3c 3, notamment dans des conditions (ph, temperature, force ionique,. . ), ou le motif i est observe in vitro. Nous avons identifie les proteines liees a l'adn par spectrometrie de masse maldi-tof et q-tof ms/ms. Il s'agit de trois proteines yhr216p, ylr432p et yml056p connues pour leur implication dans le metabolisme des purines, dont les sequences sont tres proches. Nous montrons egalement que les proteines identifiees (yhr216p, ylr432p et yml056p) s'associent au brin complementaire riche en g. A notre connaissance, il s'agit des premieres proteines de levures interagissant separement avec chacun des deux brins telomeriques dans des conditions d'incubation ou l'on observe la formation de quadruplexes de guanines et de motif i.