Abstract FR:

La cinnamoyl-coa reductase (ccr) catalyse la premiere etape specifique irreversible de la biosynthese des monolignols, unites monomeriques des lignines. Ce manuscrit decrit le premier clonage d'un adnc codant la ccr d'eucalyptus gunnii. L'etude du profil d'expression par des experiences de type northern et par hybridation in situ a montre que les messagers ccr s'accumulent principalement au niveau des organes lignifies (tiges, racines). Le gene unique codant pour la ccr a ete egalement isole chez e. Gunnii et l'etude du profil d'expression confere par la region promotrice a ete etudiee dans des tabacs transgeniques contenant une fusion traductionnelle proccr : gus. Nous avons pu demontrer que le promoteur est non seulement actif au niveau des elements vasculaires lignifies (xyleme, fibres du phloeme), mais egalement au niveau des pointes racinaires. Afin de delimiter les elements cis regulateurs responsables de ce profil d'expression tissu-specifique, des deletions seriees ont ete generees. Nous avons pu ainsi delimiter une region de 50 pb (-121-79) responsable de l'expression du gene ccr au cours du developpement. Des experiences de retard de migration electrophoretique mettant en jeu des extraits proteiques nucleaires de tabac et la region -121-79 ont montre que des interactions adn/proteines specifiques ont lieu au niveau de deux elements cis differents presents dans ce fragment. L'un de ces elements correspond au site consensus de fixation de facteurs myb (ac1). Afin de verifier l'implication des facteurs myb dans la regulation de l'activite transcriptionnelle du gene ccr, trois adnc codant pour de tels facteurs ont ete isoles chez e. Gunnii. Nous montrons que l'un de ces facteurs, egmyb1, est capable de se fixer specifiquement sur l'element ac1 du promoteur ccr confirmant ainsi que la regulation de la biosynthese des lignines est controlee par cette famille de facteurs de transcription.