Abstract FR:

La biotine synthase, une proteine homodimerique a centre fe-s, catalyse la derniere etape de la biosynthese de la biotine, a savoir l'introduction d'un atome de soufre sur la dethiobiotine. Elle appartient a la famille de proteines capables de reduire la s-adenosyl-l-methionine (adomet) en radical 5-desoxyadenosyle, ce dernier initiant la reaction par coupure homolytique d'une liaison c-h. Nous avons pu montrer en testant differents substrats deuteries sur les positions reactives, synthetises a partir de biotine, que le radical 5 -desoxyadenosyle clive directement une liaison c-h du substrat sans passer par un radical proteique intermediaire. Ces experiences ont egalement prouve qu'un radical 5 -desoxyadenosyle est implique dans la formation de chacune des liaisons c-s. Il a ete montre que le donneur de soufre etait le centre fe-s de l'enzyme. Il est lui-meme biosynthetise a l'aide d'ions sulfures provenant de la desulfuration de la cysteine par la proteine nifs ou des proteines analogues. Nous avons montre que la forme active de l'enzyme contenait un centre 4fe-4s 1 + obtenu par reduction de l'espece 4fe-4s 2 +. Cette derniere se forme en anaerobiose stricte a partir de la forme generalement isolee qui contient l'espece 2fe-2s 2 +. L'etude de la liaison de l'adomet a egalement ete initiee dans le but de determiner le nombre de sites de liaison a l'enzyme. Aucune liaison n'a ete observee avec la proteine native et nous pensons qu'une reduction du centre 2fe-2s 2 + en 4fe-4s 2 + o u 1 + est necessaire pour que l'adomet se fixe.