Abstract FR:

Les canaux chlorure sont impliques dans divers processus indispensables a la vie cellulaire, tel que la stabilisation du potentiel de membrane, la regulation du volume ou du ph, ainsi que dans les transports transepitheliaux de sels. Depuis une douzaine d'annees, l'application de la biologie moleculaire a l'etude des canaux chlorure a permis d'identifier plusieurs familles de genes. La variete fonctionnelle des canaux chlorure peut donc s'expliquer par leur diversite moleculaire. Actuellement, la determination des roles physiologiques des canaux chlorure clones constitue un enjeu majeur de leur etude. Recemment, une strategie de clonage par homologie nous a permis d'isoler deux nouveaux membres de la famille des clc, canaux chlorure dependants du voltage : le xclc-5 et le xclc-3. La caracterisation fonctionnelle et la determination de la localisation tissulaire et cellulaire de ces proteines a constitue l'objectif de notre etude. Pour cela, l'ovocyte de xenope et la lignee cellulaire hek 293 ont ete utilises comme systemes d'expression. L'analyse electrophysiologique, menee par une technique de voltage-clamp en double micro-electrodes, nous a permis de caracteriser le xclc-5 du point de vue electrophysiologique et de determiner sa sensibilite au ph, aux ions metalliques et aux inhibiteurs de tyrosine kinases. L'utilisation d'anticorps nous a permis d'etudier la glycosylation des proteines et d'examiner leur distribution tissulaire et/ou leur localisation cellulaire. Nos resultats sont discutes par rapport a ceux d'autres equipes, en pretant une attention particuliere aux modeles fonctionnels possibles, qui emergent actuellement pour les proteines clc-5 et clc-3.