Les proprietes d'assemblages cristallins liquides du procollagene
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Paris 6Disciplines:
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Le procollagene, forme precurseur du collagene, possede des extremites polypeptidiques non helicoidales appelees n- et c-propetides, qui conferent a la molecule une bonne solubilite a ph neutre alors que le collagene est soluble en milieu acide. Les proprietes d'assemblages du procollagene sont etudiees dans un tampon physiologique en solution concentree afin de verifier l'hypothese selon laquelle l'arrangement suprafibrillaire du collagene dans les tissus conjonctifs est determine au niveau moleculaire par un ordre cristallin liquide. L'optimisation du protocole de production du procollagene de type i etait une premiere etape indispensable pour ce projet. Environ 20 mg de proteine sont purifies a partir de fibroblastes de tendons d'embryons de poulet. Le procollagene est concentre entre 5 et 30 mg/ml, limite de solubilite de la proteine dans un tampon pbs a 4\c. Un ordre nematique, dans lequel les molecules se cotoient parallelement, est observe en microscopie optique a lumiere polarisee. Puis des organisations precholesteriques plus complexes se mettent en place, correspondant soit a des structures en bandes, ou la disposition des orientations moleculaires suit des ondulations, soit a des cordons precholesteriques, ou un arrangement helicoidal des molecules est verifie. Des solutions de collagene acido-soluble de type i formant des phases cristallines liquides sont d'autre part etudiees par diffraction de rayons x. Dans une organisation nematique, les interdistances mesurees sont comprises entre 50 a et 60 a. Au dessus d'une concentration de 80 mg/ml, le collagene precipite localement et forme des fibrilles, dans lesquelles les interdistances entre monomeres, proches de 13 a, sont semblables a celles rencontrees in situ. Un modele pour la morphogenese de la matrice extracellulaire est propose, dans lequel les phases cristallines liquides du procollagene precedent la fibrillogenese, l'ordre etablit entre molecules est ensuite conserve entre fibrilles.