thesis

Apports de la transgénèse à la compréhension du métabolisme des monoterpènes chez différentes espèces de menthe

Defense date:

Jan. 1, 2000

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Institution:

Saint-Etienne

Disciplines:

Directors:

Abstract EN:

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Abstract FR:

Le métabolisme des monoterpènes chez la menthe (mentha ssp. ) a été étudié en employant une stratégie de transgénèse. Dans ce but, la régénération de plantes in vitro a d'abord été recherchée chez diverses espèces de menthe. Une première méthode a été mise au point à partir de protoplastes isolés chez plusieurs cultivars de m. X piperita et appliquée sur des essais de fusion somatique par électrofusion entre m. X piperita et m. Spicata. Un second protocole de régénération a été établi à partir de disques foliaires en utilisant une succession de deux milieux de culture. Six espèces différentes de menthe ont été régénérées avec des taux allant jusqu'à 85% chez m. Arvensis. Cette dernière méthode a été employée pour transformer génétiquement, par agrobacterium tumefaciens, m. X piperita, m. Spicata et m. Arvensis, avec les gènes de la néomycine phosphotransférase II et de la -glucuronidase. M. X piperita et m. Arvensis ont ensuite été transformées avec le gène de m. Spicata, codant pour la 4s-limonene synthase intervenant dans une des premières étapes de la synthèse des monoterpènes. Dans les plantes transformées, l'intégration du transgène a été vérifiée par PCR (polymerase chain reaction) et Southern blots, sa transcription par reverse transcriptase-PCR et son expression par des dosages enzymatiques et une analyse de l'huile essentielle par chromatographie en phase gazeuse. Des modifications des profils terpéniques ont été observées, conduisant à des hypothèses de surexpression et de cosuppression de gènes, respectivement chez m. X piperita et m. Arvensis