Abstract FR:

L'augmentation de la production des mediateurs lipidiques au cours de l'inflammation est regulee principalement au niveau de l'etape initiale d'hydrolyse des phospholipides membranaires. Cette etape est controlee par l'activation de phospholipases a2 (pla2s). Parmi les nombreuses pla2s decrites a ce jour, la phospholipase a2 cytosolique de 85 kda (cpla2) presente une specificite pour les arachidonoyl-phospholipides. Elle semble etre la principale pla2 responsable de la production rapide d'acide arachidonique en reponse a l'activation de recepteurs membranaires tels que les recepteurs couples aux proteines g heterotrimeriques. Deux mecanismes principaux participent a l'activation de la cpla2 : sa translocation par le calcium, qui lui permet d'acceder a son substrat membranaire et sa phosphorylation par differentes proteines kinases dont les map kinases. Cependant, ces deux mecanismes ne suffisent pas toujours a expliquer l'activation de la cpla2, suggerant l'existence de mecanismes supplementaires. Dans un premier temps, nous avons mene deux etudes concernant les mecanismes impliques dans l'activation de la cpla2 par des recepteurs couples aux proteines gq ou gi. Dans les differents modeles cellulaires etudies, nos resultats suggerent que la phosphorylation par les map kinases et l'elevation du calcium intracellulaire ne sont pas les seuls mecanismes impliques dans l'activation de la cpla2. L'existence d'un mecanisme supplementaire pourrait rendre compte de la meilleure activation de la cpla2 par le recepteur de la bradykinine dans des cellules epitheliales tracheales mucoviscidosiques portant la mutation f508 de la proteine cftr, ou par le recepteur 2b adrenergique dans les cellules cho-2b. L'implication de composants de la membrane plasmique dans la regulation de la cpla2 a ete suggere. Afin d'etudier cette hypothese, nous avons construit des proteines chimeres de la cpla2 constitutivement ancrees a la membrane plasmique par l'extremite n- ou c-terminale. Nous avons montre que la membrane plasmique represente un site potentiel d'activation pour la cpla2. Par ailleurs, nous avons suggere que l'interaction de la cpla2 avec des microdomaines de la membrane plasmique pourrait participer a sa regulation. Cette hypothese a ensuite ete confortee en montrant que des composants lipidiques de ces microdomaines tels que la sphingomyeline, le cholesterol et les ceramides sont capables de moduler l'activation de la cpla2.