Abstract FR:

L'emission d'especes electroactives par une cellule vivante peut etre detectee en exploitant les proprietes remarquables des ultramicroelectrodes. La technique developpee utilise une ultramicroelectrode de carbone platine pour detecter en temps reel des derives de l'anion superoxyde et du monoxyde d'azote, emis par une cellule humaine activee par un stress d'origine mecanique. Cette emission constitue une reponse active de type stress oxydatif. Les processus de stress oxydatif sont impliques dans de nombreuses pathologies humaines et cette methode de detection permet ainsi d'etudier les caracteristiques quantitatives, cinetiques et spatiales de ce phenomene de grand interet biologique. L'optimisation de la methode a permis de caracteriser completement la reponse de stress oxydatif d'un fibroblaste. Le signal detecte resulte d'une emission d'especes a partir d'un point-source localise au niveau de la zone cellulaire stressee, et de leur diffusion spherique jusqu'a l'electrode. Par l'utilisation de la technique amperometrique a differents potentiels imposes, nous avons pu identifier un melange de h 2o 2, onoo, no, no 2 dont les cinetiques d'emission sont comparables. De plus, l'exploitation quantitative des mesures a montre que ces composes emis simultanement, sont produits en quantites femtomolaires (ces quantites correspondent a des concentrations de l'ordre du mm). La reponse de stress oxydatif mesuree est donc un evenement dynamique intense et de nature complexe. Celle-ci met probablement en jeu deux systemes enzymatiques de type nadph oxydase et no synthase dont l'activation est tres rapide. Nous presentons les resultats obtenus avec notre methode pour l'etude de maladies humaines impliquant le stress oxydatif : le xeroderma