Abstract FR:

Le laboratoire d'analyses isotopique et electrochimique de metabolismes (l. A. I. E. M. ) a developpe une expertise dans l'etude de la filiation isotopique liant le produit d'une transformation biologique a son substrat d'origine. Soucieux d'eprouver et de developper nos methodes analytiques, nous desirons etudier les filiations isotopiques entre deux substrats et plusieurs produits. Nous avons choisi l'etude du co-metabolisme citrate-glucose chez une bacterie lactique : lactococcus lactis subsp. Lactis biovar. Diacetylactis comme modele d'etude. Ce choix nous a conduit a developper le dosage simultane de tous les composes d'interets : citrate, glucose, diacetyle, acetoine, acides lactique et acetique. Ce dosage par rmn 1h en utilisant une reference electronique : eretic est realise directement sur le milieu de culture. Dans ce modele, l'etude par spectrometrie de masse de rapports isotopiques (smri) du 1 3c, nous a permis de prouver la participation du citrate et du glucose, a la fois, a la biosynthese de l'acide lactique et des aromes (diacetyle et acetoine). De plus, nous avons quantifie les flux metaboliques s'engageant dans les 2 voies metaboliques au cours de la cinetique de fermentation. Finalement, l'utilisation de la methodologie des plans d'experiences a permis d'etudier efficacement l'impact des certains parametres de culture - notamment la valeur 1 3c des substrats, le rapport des concentrations des substrats, le ph et la temperature - sur les concentrations finales des produits synthetises et sur leur valeur 1 3c.