Etude du polymorphisme proteique des nematodes a galles du genre meloidogyne. Differenciation serologique de m. Chitwoodi et m. Fallax
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La variabilite d'extraits proteiques solubles totaux issus de femelles adultes des quatre principales especes de meloidogyne (m. Incognita, m. Javanica, m. Arenaria et m. Mayaguensis) et des deux nematodes de quarantaine europeenne (m. Chitwoodi and m. Fallax) a ete apprehendee par electrophorese sur gel en deux dimensions (2-dge). Les profils proteiques ont ete compares, grace a un systeme d'analyse informatise, dans deux plans d'experience separes. Des proteines discriminantes et communes ont ete identifiees. Les indices de similarite et les distances genetiques entre les differentes especes etudiees ont ete calcules a partir des spots polymorphes homologues. Les dendrogrammes ont ete construits selon la methode upgma et la signification des resultats phenetiques a ete estimee par une analyse bootstrap. Malgre les differences observees, deux proteines majeures, mcf-a67 et mcf-b66, ont ete identifiees chez m. Chitwoodi et m. Fallax. Ces marqueurs proteiques ont ete microsequences apres digestion enzymatique. Les sequences amino-acides internes ont revele des similarites avec plusieurs membres d'une famille de proteines fixatrices d'acides gras intracellulaires de faible poids moleculaire. A partir de ces sequences, un peptide synthetique de mcf-a67 couple a une molecule porteuse (la klh) a ete utilise pour produire des anticorps polyclonaux de lapin. Le serum a67 obtenu permet la detection des deux nematodes de quarantaine puisqu'il reconnait les antigenes de m. Chitwoodi et m. Fallax, apres depot sur membranes de proteines extraites d'une seule femelle. L'efficacite et la sensibilite du test ainsi que ses implications pour le diagnostic des meloidogyne de quarantaine sont discutees.