Étude de la réactivité anti-tumorale des lymphocytes T V[gamma]9V[delta]2 : effet d'une diminution des ligands des Natural Killer Receptors (NKR) à la surface des lignées tumorales : expression anormale de la sous-unité α de l'ATP synthase à la surface des cellules de carcinomes rénaux et coliques
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Abstract EN:
V γ9Vdelta2 T cells frequently express inhibitory and activating MHC class I Natural Killer Receptors. Tumor cells often escape immunosurveillance by down-regulating MHC- I molecule expression. My thesis work consisted first in the study of the effect of this down-modulation on tumor cell recognition by V γ9Vdelta2 T cells. We used stable RNA interference on b2-microglobulin to generate tumor cells with MHC-I molecule down-modulation. We show the importance of the inhibitory receptor ILT-2 on the control of tumor cell lysis by V γ9Vdelta2 T cells. Down-modulation of MHC-I molecules severely reduced inhibitory signaling, but still allowed signaling by activating CD94-based receptors and unveiled NKG2D engagement. I subsequently studied one of the tumor ligands of V γ9Vdelta2 TCR, a complex containing subunits of ATP synthase abnormally expressed on the tumor cell surface. Renal and colon carcinoma cell lines express α but not β ATP synthase subunits on their cell surface. We described that unlike the β subunit, intracytoplasmic expression of the a subunit in these cell lines is abnormal, in the form of dots attached to the mitochondrial network. Using electronic microscopy we detect in these cell lines vesicles attached to the mitochondria suggesting a link between the formation of mitochondrial vesicles, expression of the a subunit on their cell surface and their recognition by V γ9Vdelta2 T cells.
Abstract FR:
Mon travail de thèse a consisté d’abord à étudier l’impact sur la reconnaissance par les lymphocytes T Vγ9Vdelta2 d’une diminution des molécules de CMH-I à la surface des cellules tumorales, phénomène classique d’échappement au système immunitaire. Les lymphocytes T Vγ9Vdelta2 expriment fréquemment des récepteurs Natural Killer activateurs et inhibiteurs spécifiques des molécules de CMH-I. La diminution des molécules de CMH-I à la surface des cellules tumorales a été obtenue par ARN interférence stable sur la β2-microglobuline. Nous montrons ainsi le rôle important du récepteur inhibiteur ILT-2 dans le contrôle de la cytotoxicité anti-tumorale des lymphocytes T Vγ9Vdelta2. La diminution de l’expression des molécules de CMH-I, suffisante pour lever les signaux inhibiteurs, permet de conserver un signal activateur délivré par un récepteur contenant CD94 et de révéler l’engagement de NKG2D. Je me suis ensuite intéressée à un des ligands tumoraux du TCR Vγ9Vdelta2, un complexe formé de sous-unités de l’ATP synthase exprimées anormalement à la surface des cellules tumorales. Les lignées de carcinomes rénaux et coliques expriment en surface la sous-unité α mais pas la sous-unité β de l’ATP synthase. Nous montrons, que contrairement à la sous-unité β l’expression intracytoplasmique de la sous-unité α dans ces lignées présente des structures en formes de points accrochés à la mitochondrie. En microscopie électronique nous décrivons dans ces lignées, l’existence de structures vésiculaires accrochées à la mitochondrie suggérant un lien entre l’apparition de vésicules mitochondriales dans ces lignées, l’expression de la sous-unité α à leur surface et leur reconnaissance par les lymphocytes T Vγ9Vdelta2.