Abstract FR:

La transduction du signal induit par la cryptogéine, un éliciteur des réactions de défense chez le tabac (Nicotiana Tabacum), se fait via des évènements précoces de phosphorylation de protéines. Lors de ce travail, l'induction de ces évènements de signalisation a été étudiée par utilisation d'inhibiteurs de protéines phosphatases (PP, acide okadaique et calyculine A) et de protéines kinases (PK, staurosporine). Le traitement des cellules de tabac par la cryptogéine ou la calyculine A induit des effets similaires : influx de Ca2 +, efflux de nitrate, alcalinisation extracellulaire et production de formes actives de l'oxygène (FAO). A l'opposé, le traitement par la staurosporine inhibe ces évènements. Ces résultats suggèrent que la transduction du signal éliciteur nécessite, via l'activation de PK et/ou l'inhibition de PP, une augmentation du taux de phosphorylation de protéines impliquées dans la signalisation cellulaire. Les protéines phosphorylées in vivo (32 P) dans les cellules de tabac par la cryptogéine, la staurosporine ou la calyculine A pendant des temps courts, ont été analysées par électrophorèse bi-dimensionnelle. Le traitement par la cryptogéine induit une augmentation du niveau de phosphorylation de 19 polypeptides. Parmi eux, 12 ont une phosphorylation dépendante de l’influx Ca2 +. La staurosporine inhibe les phosphorylations induites par la cryptogéine alors que la calyculine A active la phosphorylation de 18 des polypeptides phosphoryles par la cryptogéine. Ces polypeptides ont été caractérisés par leurs MM et pI. Deux ont été partiellement séquencés et ne correspondent à aucune protéine connue. Nous avons donc tenté le clonage de leurs gènes par PCR, une démarche qui n'a pas aboutie. Parallèlement, nous avons mis en évidence, l'implication de deux homologues de MAPK (mitogen-activated pk) de 46 et 50 kDa dans le processus de signalisation de la cryptogéine. Elles sont activées par phosphorylation, leur activation est Ca2 + dépendante et indépendante de la production de FAO.