thesis

Recherche de facteurs modulant le recodage chez saccharomyces cerevisi

Defense date:

Jan. 1, 1998

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Institution:

Paris 6

Disciplines:

Abstract EN:

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Abstract FR:

Le recodage est un phenomene traductionnel qui permet l'expression de fonctions virales ou cellulaires grace a une modification ponctuelle et programmee des regles canoniques de la traduction. Le recodage permet par exemple l'expression des fonctions catalytiques (codees par le gene pol) de la plupart des retrovirus. La traduction du gene pol depend d'un decalage de cadre de lecture ou de la translecture d'un codon stop apres la traduction du gene gag en aval. Certains genes cellulaires essentiels, de la bacterie a l'homme, necessitent egalement un evenement de recodage pour leur expression. En introduction les facteurs responsables du recodage sont passes en revue. Afin d'isoler des facteurs modulant le taux de recodage, nous avons utilise la levure s. Cerevisi comme modele d'etude. J'ai construit des vecteurs d'expression versatiles (bacteries, levures, mammiferes) contenant les phases de lecture lacz et luc, separees par une sequence cible de recodage. La comparaison des activites luciferase de constructions en phase et hors de phase, normalisees par les activites -galactosidase permet de mesurer le taux de recodage. J'ai quantifie en parallele dans des cellules d'eucaryotes superieurs et dans la levure le taux de translecture du tmv (virus de la mosaique du tabac) ou de decalage de phase du vih-1 (virus de l'immunodeficience humaine). Des resultats similaires entre les deux types de cellules valide la levure comme systeme modele d'etude du recodage. Le decalage de phase du vih est stimule par une tige-boucle en aval de la sequence glissante. Nous avons voulu savoir si l'effet de cette structure etait dependant de sa stabilite. L'etude du taux de decalage de phase en 1 en fonction du contenu en g-c de la tige-boucle a permis de montrer une correlation entre taux de recodage et stabilite de la structure. L'importance de telles etudes pour la comprehension du controle de la fidelite de la traduction, et de la traduction en general, est discutee.