Abstract FR:

L'atpase-ca 2 + du reticulum sarcoplasmique (rs) du muscle squelettique de lapin est une proteine membranaire responsable du transport actif du calcium du cytoplasme des cellules musculaires vers la lumiere du rs permettant ainsi la relaxation du muscle. Les donnees structurales suggerent la presence de dix passages transmembranaires (m1 a m10), mais ne permettent pas de localiser les sites de fixation du calcium. Neanmoins, la mutagenese dirigee a permis d'identifier six residus cles impliques dans la fixation du calcium et localises dans les segments transmembranaires m4, m5, m6 et m8. Nous avons mis en evidence l'importance d'une autre region pour la fixation de calcium : il s'agit de la boucle cytoplasmique l6-7. Apres sur expression des proteines dans la levure s. Cerevisiae, nous avons montre par mutagenese dirigee que 3 aspartates de cette region sont impliques dans la fixation du calcium a des sites de haute affinite et que ces residus sont essentiels au controle de l'activite de l'enzyme. La region cytoplasmique l6-7 de l'atpase-ca 2 + est donc une region charniere. Cette region se revele etre importante pour toutes les atpases de type p. Deux hypotheses quant au role de cette boucle sont actuellement retenues. La premiere est que cette petite boucle constitue un site d'approche ou un pre-site de transport. La seconde est que la boucle l6-7 joue un role dans l'occlusion des calcium fixes sur leurs sites transmembranaires, c'est a dire sur les six residus cle mentionnes ci-dessus. L'analyse de l'occlusion du calcium a l'aide de cr-atp sur les mutants tend a montrer que cette boucle est primordiale dans l'activation de l'enzyme par le calcium mais ne participe pas aux sites de transport qui sont totalement membranaires.