Abstract FR:

Schizosaccharomyces pombe est une levure se divisant par fission qui occupe une position phylogenetique intermediaire entre saccharomyces et les eucaryotes superieurs. Cette levure apparait donc comme etant un hote de choix pour l'expression de genes d'eucaryotes superieurs. Notre travail a consiste a developper et a optimiser des systemes d'expression pour schizosaccharomyces pombe. La premiere partie de ce travail a ete consacree a l'etude de promoteurs constitutifs, comprenant d'une part la recherche de nouveaux promoteurs de schizosaccharomyces pombe et d'autre part l'utilisation de differents promoteurs d'eucaryotes superieurs. Plusieurs sequences d'adn genomique capables de stimuler la transcription de maniere comparable au promoteur fort de reference adh ont ete isolees. Differents promoteurs d'eucaryotes superieurs ont ete testes et le promoteur du gene ie1 de cmv s'est revele comme etant le plus efficace. La fonctionnalite de l'enhancer du gene ie1 de cmv a ete evaluee. Il peut activer la transcription lorsqu'il est introduit en amont du promoteur minimal adh mais aucune stimulation de la transcription n'est observee lorsqu'il est place en aval de ce meme promoteur minimal. De plus, la recherche d'enhancers de s. Pombe n'a pas permis d'isoler de tels elements de cette levure. D'autre part, le promoteur du gene pho4, qui code pour une phosphatase acide et dont l'expression est reprimee par la thiamine, a ete etudie. Ce promoteur est aussi efficace que le promoteur adh. Sa caracterisation a permis de mettre en evidence une region de 50 pb immediatement adjacente a la tata-box qui est necessaire et suffisante pour obtenir l'activation et la regulation de la transcription. Cette uas peut fonctionner independamment de son orientation mais elle perd sa capacite a reprimer la transcription en presence de thiamine quand elle est eloignee de 40 pb de la tata-box. Le systeme schizosaccharomyces pombe developpe lors de ce travail a ete utilise pour la production d'un antigene de surface de toxoplasma gondii a interet diagnostique.