Abstract FR:

Nous avons choisi la differenciation hematopoietique in vitro des cellules souches embryonnaires (cellules es) de souris inactivees pour le gene c-mpl (mpl - / -) pour etudier la fonction de differents domaines intracellulaires de mpl, le recepteur de la thrombopoietine (tpo), dans differents compartiments hematopoietiques en reponse a la tpo seule ou en synergie avec d'autres cytokines. Ce modele donne acces, en plus des progeniteurs myeloides et des cellules matures, a des cellules plus immatures, les bl-cfc (blast colony-forming cell) qui representent l'equivalent in vitro de l'hemangioblaste. Dans nos conditions, mpl ou les differents mutants sont exprimes dans toutes les cellules derivees des cellules es. Tout d'abord la reintroduction de mpl dans les cellules es mpl - / - permet (1) de restaurer la reponse des cfu-mk et des megacaryocytes (mks) a la tpo (2) le developpement, en reponse a la tpo seule, de tous les autres progeniteurs myeloides (bfu-e, cfu-gm et cfu-mix) et celui des bl-cfc, normalement dependantes du vegf, indiquant que mpl n'a pas de role instructif et peut se substituer aux autres recepteurs de cytokines mais aussi a un recepteur a activite tyrosine kinase intrinseque, flk-1 un des recepteurs du vegf, (3) un effet synergique de la tpo et d'autres cytokines sur le developpement des bl-cfc et des cfu-gm. Les regions consensus boite 1 et boite 2 qui fixent la proteine tyrosine kinase jak2 sont indispensables a la fonction de mpl. La deletion du domaine c-terminal de mpl n'annule pas completement le developpement des cfu-mk et de bfu-e en presence de tpo, un nombre faible mais significatif se developpe. Par contre, elle annule completement celui des cfu-gm et bl-cfc en presence de tpo. Cette deletion