Regulation de la replication de minichromosomes et role de la topoisomerase 2 dans les extraits d'ufs de xenope
Institution:
Paris 6Disciplines:
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Abstract EN:
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Abstract FR:
Nous nous sommes interesses a plusieurs aspects de la regulation de la replication dans les extraits d'ufs de xenope. Afin de comprendre comment, au cours du developpement precoce, la totalite de l'adn est repliquee a coup sur en absence d'initiation specifique, nous avons analyse la distribution des origines de replication sur des plasmides de taille variable. Nous avons montre que les evenements d'initiation ne sont ni regulierement espaces ni actives de facon synchrone. De plus la probabilite d'activer une nouvelle origine de replication augmente au cours de la phase s. Nous proposons que les origines de replication potentielles sont abondantes et distribuees aleatoirement, et que la combinaison de l'augmentation de la probabilite de l'activation des origines et l'interference entre origines permettent la replication complete du genome pendant la phase s. Nous avons etudie le role de la topoisomerase ii au cours de la replication de l'adn. Nous avons demontre que la topo ii n'est indispensable ni pour la formation de noyaux ni pour la replication complete de l'adn. Cependant dans des noyaux assembles en absence d'activite topo ii l'adn est replique plus lentement. Nous avons montre que la topo ii enleve les enlacements ou precatenanes derriere les fourches de replication tout au long de la replication. En fin de phase s, tres peu de dimeres catenes persistent. Un mecanisme doit favoriser la decatenation en absence de tout evenement mitotique. Nous avons observe la formation d'un nouveau type de jonctions adn-adn sans homologie au point jonction. Leur structure la plus probable est de type hemicatenane. La formation de ces hemicatenanes est associee a des defauts de replication spontanes ou bien induits. Nous supposons que ces hemicatenanes pourraient correspondre a une etape precoce dans la formation d'intermediaires de recombinaison en reponse a defauts dans la synthese d'adn.